Инфекциозна диагностика върху менструална тъкан при репродуктивни проблеми // Infectious diagnostics on menstrual tissue in reproductive problems
Зареждане...
Дата
2023
Автори
Месечкова, Кремена Стойчева // Mesechkova, Kremena Stoycheva
Заглавие на списанието
ISSN на списанието
Заглавие на тома
Издател
Медицински университет - София // Medical University - Sofia
Резюме
РЕЗЮМЕ
Безплодието засяга почти 10 % от световната популация в репродуктивна възраст, като 200 000 двойки в България страдат от диагнозата, което я превръща в национален медико-социален проблем. Невъзможността на двойката да създаде поколение се класифицира от Световната здравна организация (СЗО), като петото най-значимо сериозно глобално увреждане с отрицателно въздействие върху самочувствието и живота на потърпевшите. Настоящият дисертационен труд се фокусира върху инфекциозната етиология на женско безплодие в горен генитален тракт. Целта беше разработване на нов подход за неинвазивна диагностика на ендометриални инфекции върху проба- менструална тъкан. Менструалната тъкан съдържа части от функционалния слой на ендометриума (децидуа) и обхваща специфичния периметър на вирусна/бактериална активност и имплантация на бъдещия ембрион. Изборът на менструална тъкан, като целева биологична проба е оптимален вариант поради факта, че класическите биологични проби, информативни за състоянието на ендометриума (ендометриални биопсии) са инвазивни. В дисертационното проучване бяха проведени молекулярно-инфектологични анализи за бактериално-вирусен панел (Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum/ parvum, Mycomplasma hominis/genitalium, Gardnerella vaginalis, HSV1/2, EBV, CMV, VZV, HHV-6, HHV-7, HHV-8) върху 335 жени с български произход. Изследваните жени бяха разпределени в три клинични групи спрямо вида биологичен материал и анамнеза за репродуктивна несполука: клинична инфертилна група /180 жени с биологична проба менструална тъкан и разнообразна анамнеза; контролна инфертилна група /65 жени с биологична проба ендометриална биопсия и анамнеза за спонтанни аборти/; здрава контролна група /90 фертилни жени с биологична проба менструална тъкан/. Инфертилната контролна група, представена от жени с ендометриални биопсични проби, служи да се извърши сравнителен анализ с клиничната инфертилната група, за да демонстрира възможността менструална тъкан да се използва като неинвазивна биологична проба, аналогична като рерпрезентативност на инвазивната ендометриална биопсия. В инфертилната клинична група бяха детектирани позитивни инфекции в 61,1 % (48,8 % бактериални и 22,2% вирусни), което кореспондира с данните в клиничната контролна група: 64,53% (49,23% бактериални и 15,3% вирусни патогени). Изследваната здрава контролна група се оказа 100 % негативна по отношение на целевия диагностичен панел. Бактериите Gardnerella vaginalis и Ureaplasma parvum бяха открити в 69,31% и 61,36% от всички позитивни менструални тъкани и 31,25% и 3,12% от всички бактериално инфектирани ендометриални биопсии. Активна инфекция с Mycomplasma hominis и Ureaplasma urealyticum беще детектирана с еквивалентна честота 2,27 % в позитивните за бактериални патогени менструални тъкани. Активна инфекция с EBV, CMV, HHV-6, HHV-7 беше открита в 30%, 30%, 20% и 20% от позитивните за вирусни фактори ендометриални биопсии и в 40%, 7,5%, 10% и 42 ,5% от менструалните тъкани. Следните таргетни патогени не бяха открити в нито една от менструалните тъкани на изследваните пробанди: Chlamydia trachomatis, Mycomplasma genitalium, HSV1, VZV и HHV-8. В ендометриалните биопсии не бяха детектирани: Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Mycomplasma hominis/genitalium, HSV1/2, VZV и HHV-8. Освен за прицелния бактериално-вирусен панел, ендометриалните биопсии бяха тествани също за анаеробни и аеробни бактериални микроорганизми, част от които опортюнистични, както и коменсална фракция с цел проверка на ендометриалния баланс. Състояние на анаеробна и аеробна дисбактериоза беше открито при 53,33% и 27% във всички бактериално инфектирани ендометриални проби. Подобно изследване липсва върху пробандите с менструална тъкан, поради невъзможност от прилагане на използвания метод върху този тип проба. Наблюдаваните сходни проценти на положителни за инфекции пациенти в инфертилната група (61,1%), изследвани с проба менструална тъкан и (64,53) в контролната инфертилна група, изследвани с проба ендометриална биопсия, демонстрират репрезентативността на неинвазивната менструалната тъкан като представителна проба за горен женски генитален тракт и потвърждават възможността същата да бъде използвана вместо инвазивна ендометриална биопсия. В двете групи наблюдавахме абсолютно съвпадение в процента на пациенти с положителен инфекциозен статус и разпределението им според бактериална или вирусна етиология. На ниво видово-специфична извадка, менструалната тъкан и ендометриалната биопсия показаха известни разлики в детектираните проценти патогени, което намира логично обяснение в разнородност на извадката и анамнезата на пробандите. Докладваният отрицателен инфекциозен статус при 100% от изследваните здрави контроли, ясно сочи за негативно влияние на таргетния инфекциозен панел върху безплодието при жени. Допълнително доказателство за репрезентативността на менструалната тъкан е фактът, че при успоредно тестване на пациентска извадка (15% от контролната инфертилна група) с двата типа проби, ендометриална биопсия и менструална тъкан, имаме 100% съпоставимост на резултатите. Фокусът на настоящата разработка, а именно разработване на нов подход за неинвазивна диагностика на инфекции в горен женски генитален тракт чрез анализ на менструална тъкан, способства за улесняване на диагностичната практика и изясняване на инфекциозната етиология за репродуктивна несполука. Това е от съществено значение за прилагане на нов скринингов диагностичен алгоритъм при жени с репродуктивни несполуки и провеждане на индивидуализирана терапия. Реализираната естествена концепция след проведена терапия в 97% от случаите с ендометриална дисбиоза и положителен инфекциозен статус по отношение на таргетния обхват, представлява категорично доказателство за ползата от приложението на въведения алгоритъм за диагностика и мониторинг.
//
SUMMARY
Infertility affects almost 10% of the world’s population of reproductive age, as 200,000 couples in Bulgaria are suffering from the diagnosis, which means it is a national medico- social problem. The inability of a couple to create a child is classified by the World Health Organization (WHO) as the fifth most significant serious global disability with a negative impact on the self-esteem and quality of life of the probands. The current dissertation focuses on the infectious etiology of female infertility in the upper genital tract. The aim was to develop a new approach for non-invasive diagnosis of endometrial infections on a sample: menstrual tissue. Menstrual tissue contains parts of the functional layer of the endometrium (decidua) and covers the specific perimeter of viral/bacterial activity and implantation of the future embryo. The choice of menstrual tissue as a target biological sample is an optimal and appropriate variant because the classic biological samples representative of the state of the endometrium (endometrial biopsies) is invasive. In the current scientific work, molecular-infectological investigations for a bacterial-viral panel (Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum/parvum, Mycomplasma hominis/genitalium, Gardnerella vaginalis, HSV1/2, EBV, CMV, VZV, HHV-6, HHV-7, HHV -8) were performed on 335 women of Bulgarian origin. The studied women were divided into three clinical groups according to the type of biological material and history of reproductive failure: clinical infertile group / 180 women with menstrual tissue and a diverse history; control infertile group /65 women with endometrial biopsy and history of miscarriages/; healthy control group /90 fertile women with menstrual tissue/. The infertile control group /endometrial biopsy/ serves to be performed comparative analysis with the clinical infertile group with purpose to demonstrate the possibility of using menstrual tissue as a non-invasive biological sample with analogous representativeness of invasive endometrial biopsy. Positive infections were detected in 61.1% (48.8% bacterial and 22.2% viral) in the infertile clinical group, which corresponds to our data in the clinical control group: 64.53% with positive infection status (49.23% bacterial and 15.3% viral pathogens). The studied healthy control group was 100% negative for the target diagnostic panel. Gardnerella vaginalis and Ureaplasma parvum were detected in 69,31% and 61,36% of all positive menstrual tissues and 31,25% and 3,12% of all bacterial infected endometrial biopsies. Active infection with Mycomplasma hominis and Ureaplasma urealyticum was found in an equal rate of 2,27 % of all bacterial infected menstrual tissues. Active infections of EBV, CMV, HHV6 and HHV7 were detected in 30%, 30%, 20% and 20% of the positive for viral factors endometrial biopsies and in 40%, 7,5%, 10% and 42,5% in menstrual tissue samples. The next target pathogens were not detected in the menstrual tissue of studied probands: Chlamydia trachomatis, Mycomplasma genitalium, HSV1, VZV, HHV8. Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Mycomplasma hominis/genitalium, HSV1/2, VZV, HHV8 were not detected in the endometrial biopsies. In addition to the target bacterial-viral panel, endometrial biopsies were studied also for anaerobic and aerobic bacterial microorganisms, (some of which are opportunistic), as well as a commensal fraction in order to verify the endometrial balance. Anaerobic and aerobic dysbiosis was detected in 53,33% and 27% of the bacterial infected endometrial samples. A similar study was not available on the probands, investigated with menstrual tissue due to the impossibility of applying the method used on this type of sample. The observed similar rates of infection-positive patients in the infertile group (61.1%) examined by menstrual tissue and (64.53) in the infertile control group examined by endometrial biopsy demonstrate the representativeness of non-invasive menstrual tissue as a representative sample for the upper female genital tract and confirm the option to be used instead of an invasive endometrial biopsy. In both groups was observed an absolute correspondence regard to percentage of patients with a positive infectious status and the distribution of bacterial or viral etiology. Menstrual tissue and endometrial biopsy showed some differences regarding the type-specific pathogens detected which finds a logical explanation in the heterogeneity of the sample collection and the anamnesis of the probands. The reported negative infection status in 100% of the examined healthy controls clearly indicates a negative impact of the targeted infectious panel on female infertility.
Additional proof of the menstrual tissue’s representativeness is given by the parallel testing of 15% of the infertile control group with both types of samples /endometrial biopsy and menstrual tissue/ and the observed 100% comparability of results. Our focus of research on a new approach for noninvasive diagnostics of infections in the upper female genital tract by analysis of menstrual tissue contributes to the diagnostic practice and clarifies the infectious etiology of reproductive failure. It is of a great importance for applying of a new screening diagnostic model for women with reproductive problems and for adequate and individualized therapy. The realized natural conception after applied therapy in 97% of cases with endometrial dysbiosis and positive infectious status in regard to the target panel represents definitive evidence about the benefits of application of introduced algorithm for diagnostics and monitoring.
Описание
Ключови думи
инфекциозни болести; вирусни болести - диагностика; репродуктивна медицина; микробиология; безплодие; ендометриум - патология; инфекции, бактериални и микози // communicable diseases - diagnosis; virus diseases - diagnosis; reproductive medicine; microbiology; infertility; endometrium - pathology; bacterial infections and mycoses