Детекция на продуценти на карбапенемази сред клинични изолати Klebsiella pneumoniaе чрез използване на фенотипни методи
thumbnail.default.placeholder
Дата
2016-02
Автори
Стоева/Stoeva, Т./T.
Марковска/Markovska, Р./R.
Божкова/Bozhkova, М./M.
Димитрова/Dimitrova, Д./D.
Божкова/Bozhkova, К./K.
Митов/Mitov, И./I.
Заглавие на списанието
ISSN на списанието
Заглавие на тома
Издател
Централна медицинска библиотека, МУ София / Central Medical Library, MU Sofia
Резюме
Резюме: Цел: Сравнително проучване на фенотипни методи за детекция на продуцен-
ти на карбапенемази, приложени върху клинични изолати K. pneumoniae, про-
дуциращи карбапенемази, предварително охарактеризирани чрез молекуляр-
ногенетични методи. Материал и методи: Тествани бяха общо 46 карбапе-
нем-резистентни изолата K. pneumoniae, продуценти на три типа карбапене-
мази: KPC-2 (n = 42), VIM-1 (n = 3) и OXA-48 (n = 1). Чувствителността на изо-
латите към imipenem и meropenem беше определена чрез дисково-
дифузионен метод и чрез автоматизираната система Phoenix (BD), а резулта-
тите – интерпретирани според препоръките на CLSI-2014. Извършени бяха
следните фенотипни тестове за доказване продукция на карбапенемази: мо-
дифициран тест на Hodge, двойнодисков тест за синергизъм (ДДТС) с boronic
acid, dipicolinic acid и EDTA и дискове imipenem и meropenem, както и комбини-
ран дисков метод (КДМ) с дискове ertapenem/cloxacillin и imipenem/cloxacillin,
като резултатите бяха интерпретирани според препоръките на CLSI-2014 и
EUCAST-2013. Резултати: Минималната потискаща концентрация (МПК) на
imipenem и meropenem за тестваните изолати варираше между 4 mg/L и > 16
mg/L. Тестът на Hodge беше положителен при всички изолати. Двойнодиско-
вите тестове за синергизъм с boronic acid, dipicolonic acid и EDTA идентифици-
раха всички KPC-2 и VIM-1 продуценти, но останаха негативни за ОХА-48 про-
дуциращия щам K. pneumoniae. При нито един от изолатите не се установи
увеличаване на зоната на задръжка на бактериалния растеж с > 4 mm около
дисковете ertapenem/cloxacillin и imipenem/cloxacillin в сравнение със зоните на
задръжка около дисковете, натоварени само с ertapenem и imipenem. Заклю-
чение: Методът, базиращ се на инхибиране на карбапенем-хидролизиращи
ензими от специфичен инхибитор (ДДТС, КДМ), е точен метод за иден-
тификация на ензимите от класове А и В, но не и за клас D. В тези случаи в
рутинната практика трябва да се разчита на модифицирания тест на Hodge за
детекция на ОХА-48 продуцентите. Комбинираното приложение на тестваните
методи в рутинната лабораторна практика осигурява надеждна детекция на
изолати K. pneumoniae, продуциращи различни типове карабапенемази. ***** Summary: Oblectives: To evaluate two phenotypic tests for detection of different types of
Klebsiella pneumoniae carbapenemases, previously characterized by molecular-
genetic methods. Methods: A total of 46 carbapenem resistant K. pneumoniae
clinical isolates, producers of 3 types of carbapeneases were tested: KPC-
2 (n = 42), VIM-1 (n = 3) and OXA-48 (n = 1). Susceptibility to imipenem and
meropenem was determined by disc-diffusion method and Phoenix authomated
system (BD). The results were interpreted according to current CLSI guidelines
(2014). We performed the following phenotypic methods for carbapenemase
detection: the modified Hodge test, the double disc synergy test (DDST) with
boronic acid, dipicolinic acid, EDTA and discs imipenem and meropenem, as
well as the combined-disc method (CDM) with discs ertapenem/cloxacillin and
imipenem/cloxacillin. The results were interpreted according to CLSI-2014 and
EUCAST-2013 guidelines. Results: MICs of imipenem and meropenem for the
tested isolates varied between 4 mg/L and > 16 mg/L. All isolates demonstrated
positive Hodge test. DDST with boronic acid, dipicolinic acid and EDTA identified
all KPC-2 and VIM-1 producers, but not the single OXA-48 positive isolate
of K. pneumoniae. No synergy of ertapenem and imipenem with cloxacillin ( 5
mm) was observed in any of the tested isolates. Conclusion: The method based
on the inhibition of carbapenem-hydrolyzing enzymes by specific inhibitors
(DDST, CDM) is accurate method for identification of class A and B enzymes,
but not for class D enzymes. In these cases the modified Hodge test will ensure
the detection of OXA-48 producers. Combined application of the evaluated
methods in the diagnostic microbiological laboratory will provide reliable detection
of K. pneumoniae isolates, producers of different types of carbapenemases.
Описание
Адрес за кореспонденция: Доц. д-р Теменуга Стоева, дм, Катедра по микробиология, МУ,
ул. „Марин Дринов” № 55, 9002 Варна, e-mail: temenuga.stoeva@abv.bg ***** Address for correspondence: Assoc. Prof. Temenuga Stoeva, M. D., Department of Microbiology,
Medical University, 55, Marin Drinov St., Bg – 9002 Varna,
e-mail: temenuga.stoeva@abv.bg
Ключови думи
K. pneumoniae, карбапенемази, лабораторна детекция , K. pneumoniae, carbapenemases, laboratory detection
Цитирания
Т. Стоева, Р. Марковска, М. Божкова, Д. Димитрова, К. Божкова и И. Митов. Детекция на продуценти на карбапенемази сред клинични изолати Klebsiella pneumoniaе чрез използване на фенотипни методи - Медицински преглед, 52, 2016, № 1, 35-41.